Bu çalışmada tüm hücre diyaliz patch kenetleme tekniğini kullanarak yeni doğan sıçanlardan kültürü yapılmış dorsal kök gangliyon (DKG) sinir hücrelerini pertussis toksin (PTX) ile 3-8 saat ön muamele ederek kafeinin bu hücrelerin hücre içi Ca2+-depolarından Ca2+ salıverişine etkisini inceledik. Voltaj-bağımlı Ca2+ akımları ve Ca2+-bağımlı klor ve non-selektif katyon akımları farmakolojik olarak izole edildi. Ca2+-bağımlı klor ve non-selektif katyon akımları hücre membranına yakın bölgelerde hücre içi serbest Ca2+ miktarındaki artışın indikatörü olarak kullanıldı. DKG hücreleri –90 mV’ta voltaj kenetlendiğinde, kafeinin (1 mM) hücre dışına uygulanması çalışılan 37 hücrenin 34’ünde sırasıyla ortalama 278±12 sn (n=8) gecikme ile ortalama pik amplitütü –1.33±0.12 nA (n=8) olan içe yönelik membran akımları aktive etti. Ekstrasellüler kayıt solüsyonundan Ca2+ uzaklaştırıldığında da gözlenen kafeinin indüklediği içe yönelik membran akımlarının ortalama pik amlitütü –1.27±0.11 nA (n=7) ve kafein uygulamasından kafeine ilk cevabın ortaya çıkmasına kadar geçen ortalama süre 298±9 sn (n=7) olarak belirlendi. Kafeine cevaplar intrasellüler uygulanan ryanodin (10 mM) ile önlendi (n=5), fakat ryanodinin inaktif analoğu olan anhidroryanodin (100 mM) bu cevapları önleyemedi (n=7). Ca2+ şelatörü 1,2-bis-(O-aminophenoxy)ethan-N,N,N',N'-tetraasetik asit, tetraasetoksimetil ester (BAPTA-AM) intrasellüler uygulandığında kafeinin indüklediği içe yönelik akımları önlendi (n=5). Fakat, kültüre hücrelerin 3-8 saat süreyle PTX ile ön muameleye tabi tutulması kafeine cevapları etkilemedi (n=12). Bu bulgular kafeinin DKG hücre kültüründe PTX duyarlı G-proteinlerinden bağımsız bir mekanizma ile hücre içi depolardan Ca2+ salıverilmesine yol açtığını ortaya koymaktadır.